2018-12-05 11:18:20
近兩年，蛭弧菌凍干粉市場突然大熱起來。細(xì)思下來，一方面水產(chǎn)養(yǎng)殖的密度在增加，各種未知疾病或者混合型疾病日益增多；另一方面，從公司至經(jīng)銷商再到養(yǎng)殖戶，面對日益增加又難以查明的疾病，多數(shù)是束手無策，很多化學(xué)型消毒劑，效果來的快去的也快，有時(shí)候刺激大一些，而且也不能總是經(jīng)常使用，因此蛭弧菌又重新被大家推廣起來。
近期，江蘇南京新的生物制品有限公司于10月中旬在蛭弧菌凍干上面投入近百萬采購了一臺(tái)大型凍干機(jī)（單次凍干1萬瓶），實(shí)現(xiàn)了從蛭弧菌母液發(fā)酵到凍干全過程的可控制。這種近百萬的大型凍干機(jī)投入到底劃算不劃算？為此筆者采訪了南京新的生物制品有限公司負(fù)責(zé)水產(chǎn)事業(yè)版塊的趙經(jīng)理，希望就蛭弧菌的凍干產(chǎn)品做一些了解。
問：蛭弧菌和普通微生物產(chǎn)品有什么不同？趙經(jīng)理：首先，效果表達(dá)的途徑不一樣。普通微生物在水產(chǎn)養(yǎng)殖上發(fā)揮效果大多數(shù)是通過“占位理論”實(shí)現(xiàn)的（在體外或體內(nèi)），或者通過分泌胞外物質(zhì)抑制其他微生物繁殖而發(fā)揮效果，而蛭弧菌不是，蛭弧菌具有“不服則干”的特性，其通過寄生和裂解的生理手段，能在體外直接殺滅一些有害菌，還能在體內(nèi)發(fā)揮有益微生物的效果，這使得蛭弧菌有著益生素和“活性抗生素”的雙重特性。
其次，在發(fā)酵上面，普通微生物發(fā)酵是在人工合成的培養(yǎng)基里接種菌種。而蛭弧菌發(fā)酵則要先生產(chǎn)大腸桿菌，提供宿主菌，再接種蛭弧菌種。
另外，普通的微生物一般是通過無性二分裂方式繁殖，而蛭弧菌是通過復(fù)制的方式繁殖。前者繁殖速度很快，后者的速度較慢。
問：為什么南京新的生物在凍干設(shè)備上投入近百萬？
趙經(jīng)理：南京新的生物制品有限公司之所以在凍干設(shè)備上投入如此資金，主要是考慮以下幾點(diǎn)：
1.南京新的生物生產(chǎn)蛭弧菌已有10多年的時(shí)間，蛭弧菌產(chǎn)品的演變也一直非常關(guān)注，最早的液體產(chǎn)品，我們就一直用發(fā)酵罐進(jìn)行生產(chǎn)，但是液體產(chǎn)品的保藏始終面臨一些問題，這對實(shí)際使用效果有非常大的影響，南京新的生物也一直在思考如何突破技術(shù)和成本的雙重難關(guān)，而凍干則是最好的一種保存方式。
2.我們一直在關(guān)注凍干，也組織了專家對凍干產(chǎn)品的原理及與蛭弧菌的結(jié)合做了論證，早期主要是硬件的成本投資太高，同時(shí)產(chǎn)品銷量預(yù)估受第一階段蛭弧菌下降的影響，未敢一次性投入，于是采取代工的形式生產(chǎn)蛭弧菌凍干粉，此期間，我們做了大量的試驗(yàn)，確保了蛭弧菌凍干粉產(chǎn)品的穩(wěn)定性，同時(shí)也確定了蛭弧菌原裝凍干在產(chǎn)品保質(zhì)期上的突破具有無與倫比的優(yōu)勢。
3.近兩年養(yǎng)殖密度整體是呈現(xiàn)上升趨勢，而且生態(tài)防控這個(gè)概念也不斷加強(qiáng)，水體內(nèi)的總菌數(shù)、異養(yǎng)菌數(shù)、弧菌數(shù)的控制變成一個(gè)難題，只依靠化學(xué)類消毒劑無法完成這個(gè)工作，因?yàn)榛瘜W(xué)消毒劑效果來得很快，但去的也很快，而蛭弧菌恰恰可以彌補(bǔ)這個(gè)缺陷，因?yàn)轵位【娜秉c(diǎn)是效果來得慢一些，但是中后期的防控時(shí)間特別長，其發(fā)揮的效果基本可以達(dá)到15天左右，同時(shí)再加上成品質(zhì)量的穩(wěn)定性在不斷進(jìn)步，所以使用效果上面得到了較好的體現(xiàn)，產(chǎn)品的總量也在增加。
4.我們本身有很多的代工客戶，很多都是在我們公司代工生產(chǎn)蛭弧菌液體，這兩年隨著市場對蛭弧菌凍干粉的呼聲越發(fā)高漲，他們也在催促我們上一臺(tái)凍干機(jī)，可以讓他們有更多的選擇。
綜合以上幾個(gè)方面，公司在2018年下定決心，于10月份采購了一臺(tái)價(jià)值近百萬的大型凍干機(jī)，以完成從蛭弧菌母液發(fā)酵至蛭弧菌凍干的全程掌控，從而能為客戶提供穩(wěn)定的蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品。
問：蛭弧菌“原裝凍干”有哪些產(chǎn)品優(yōu)勢？趙經(jīng)理：目前蛭弧菌類產(chǎn)品基本上有兩類，一是液體，一是凍干粉。
蛭弧菌液體的產(chǎn)品始終面臨保存的問題，實(shí)際上也有很多的論文對此做了研究，有的文章指出，大多數(shù)的液體蛭弧菌產(chǎn)品在4℃的環(huán)境下，可以保存8個(gè)月以上，少數(shù)6個(gè)月以上。但在25℃的環(huán)境下，蛭弧菌液體產(chǎn)品的保質(zhì)一般只在4個(gè)~6個(gè)月了。
當(dāng)然隨著保護(hù)劑的不斷研發(fā)，隨著添加不同的保護(hù)劑，在4℃的環(huán)境下，某些液體產(chǎn)品的保質(zhì)期可以達(dá)到15個(gè)月以上，有的可以達(dá)到兩年以上，但是所有的保存環(huán)境溫度都指向4℃，這對我們實(shí)際的銷售場景是不太相符的。當(dāng)然，液體也有好處，菌種復(fù)蘇時(shí)間快，如果從實(shí)際銷售出發(fā)，建議在經(jīng)銷點(diǎn)增設(shè)冷藏柜，這樣可以延長液體產(chǎn)品的保持期。
另外，就是目前大家所接觸比較多的蛭弧菌凍干產(chǎn)品了，尤其是強(qiáng)調(diào)蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品。在相關(guān)的研究中，4℃的環(huán)境下，添加了保護(hù)劑的蛭弧菌液體產(chǎn)品在13個(gè)月后其復(fù)蘇率為100%，而同樣的環(huán)境下，凍干產(chǎn)品在21個(gè)月后其復(fù)蘇率仍為100%。
而且真正的蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品，具有以下優(yōu)點(diǎn)：
1.冷凍干燥生產(chǎn)工藝是在低溫下進(jìn)行的，對于許多熱敏性的物質(zhì)特別適用。蛭弧菌不會(huì)發(fā)生變性或失去生物活力，這一點(diǎn)非常重要。
2.整個(gè)冷凍生產(chǎn)過程基本上是在低溫真空狀態(tài)下完成的，在這種狀態(tài)下，微生物的生長和酶作用是受到抑制的，可以很好地保證蛭弧菌產(chǎn)品的穩(wěn)定性。
3.因在真空下操作，氧氣極少，因此，一些易氧化的物質(zhì)（如油脂類）得到保護(hù)。
4.冷凍干燥法能排除95%~99%以上的水分，產(chǎn)品能長期保存而不變質(zhì)。
以上就是蛭弧菌凍干產(chǎn)品的優(yōu)勢所在，也是其穩(wěn)定性的保障所在。
問：蛭弧菌原裝凍干產(chǎn)品有什么特征？
趙經(jīng)理：市面上有很多蛭弧菌凍干粉，有很多是呈現(xiàn)流動(dòng)性粉狀的，也有一些是塊狀的，可能是生產(chǎn)工藝有所差別。但我們還是認(rèn)為“原裝凍干”是一種最好的工藝，最主要是原裝凍干是在凍干機(jī)內(nèi)完成封裝的，瓶內(nèi)保持著真空凍干狀態(tài)，能最大可能地保存產(chǎn)品的活性，提供產(chǎn)品最好的穩(wěn)定性，原裝凍干產(chǎn)品一般有以下幾個(gè)特征：
第一、產(chǎn)品在小的西林瓶中呈現(xiàn)的是一種塊狀物，用手拿起瓶子晃動(dòng)，感覺像一塊小小的泡沫，有很輕的感覺。另外，就是西林瓶裝的原裝凍干產(chǎn)品肯定不可能是粉劑。
第二、原裝凍干和非原裝凍干產(chǎn)品在包裝上也有所差異，雖然都是西林裝封裝的，但是兩種產(chǎn)品封裝的瓶蓋都會(huì)存在明顯差異，主要的原因在于凍干的過程中需要做適當(dāng)保護(hù)，不能直接將液體暴露在環(huán)境中，需要在西林瓶上進(jìn)行遮蓋，但完全遮蓋是不行的，這會(huì)阻擋冰的升華，所以需要用一種帶導(dǎo)氣槽的橡膠皮塞進(jìn)行半遮蓋，讓瓶內(nèi)、外的空氣可以流動(dòng)，不會(huì)阻擋冰的升華，而在一般環(huán)境下生產(chǎn)的產(chǎn)品是不需要用這種帶導(dǎo)氣槽的橡膠皮塞的，差異還是很明顯的。
第三、去掉西林瓶蓋上的塑料和鋁包片后，只留下橡膠瓶蓋的時(shí)候，用手拔出橡膠瓶蓋的時(shí)候，你會(huì)明顯的聽到“嘣”的一聲，可以看到凍干的塊狀物在瓶中的跳動(dòng)，主要的原因，是因?yàn)樵b凍干是在凍干機(jī)中直接完成封蓋的過程，瓶體中是處于一種真空狀態(tài)的，因此在拔出瓶蓋時(shí)，因?yàn)槠績?nèi)、外壓力的差異極大，空氣的快速流動(dòng)引起了“嘣”的聲音產(chǎn)生，同時(shí)塊狀物會(huì)跳動(dòng)。
第四、極易吸水，1秒溶解。直接的表現(xiàn)就是將水倒進(jìn)小瓶內(nèi)，小瓶里的物料1秒就溶解完了，而且溶解均勻。實(shí)際上，這主要因?yàn)楸桓稍镂锪虾械乃质窃趦鼋Y(jié)狀態(tài)下直接蒸發(fā)的，故在干燥過程中，水汽不帶動(dòng)可溶性物質(zhì)移向物料表面，不會(huì)在物料表面沉積鹽類，即在物料表面不會(huì)形成硬質(zhì)薄皮，亦不存在因中心水分移向物料表面時(shí)對細(xì)胞或纖維產(chǎn)生的張力，不會(huì)使物料干燥后因收縮引起變形，故極易吸水恢復(fù)原狀。
問：蛭弧菌如何在水產(chǎn)養(yǎng)殖中如何合理應(yīng)用？趙經(jīng)理：任何一種產(chǎn)品要研究其如何應(yīng)用，肯定是分兩個(gè)層面進(jìn)行探究，一是要符合產(chǎn)品的基本特性，不能違背基本規(guī)律；二是在實(shí)際應(yīng)用場景中，要和現(xiàn)實(shí)相結(jié)合，尋找最佳的使用方法。
首先要了解蛭弧菌的幾個(gè)特性：蛭弧菌的生長，一般要求pH6.0-8.5；溫度23℃~37℃，低于12℃，高于42℃時(shí)均不生長；能穩(wěn)定分解蛋白質(zhì)，一般不利用碳水化合物，而以肽、氨基酸作碳源和能源；能液化明膠；嚴(yán)格好氧。同時(shí)蛭弧菌的靶向性問題并沒有很多的研究，但總體上其偏向革蘭氏陰性桿菌，只裂解較為少數(shù)的革蘭氏陽性桿菌。同時(shí)，蛭弧菌的安全性也得到了一些論文的驗(yàn)證，迄今為止，相關(guān)報(bào)道表明，蛭弧菌對人和某些動(dòng)物無毒害作用。
在實(shí)際使用中需要注意以下幾點(diǎn)：
第一、溫度不在適宜范圍的時(shí)候，蛭弧菌生長是非常緩慢的，所以使用時(shí)要充分考慮這一點(diǎn)。比如3月、4月份用它去泡苗，效果肯定不會(huì)好，但如果改成拌料投喂，則會(huì)對腸道控菌產(chǎn)生積極影響。總體來說，蛭弧菌使用主要分為內(nèi)服和外潑兩個(gè)方面，內(nèi)服不受溫度限制，而外潑則要考慮溫度問題。
第二、蛭弧菌的繁殖是需要氧氣的，使用的時(shí)候也建議在早上8點(diǎn)~10點(diǎn)使用，這樣可以獲得較為充足的溶氧。另外，其耗氧不會(huì)達(dá)到非常劇烈的程度，因?yàn)槠浞敝炒鷷r(shí)一般要4小時(shí)~6小時(shí)。
第三、蛭弧菌的安全性應(yīng)該如何得到最大化的利用呢？
實(shí)際上，我們重點(diǎn)推薦在甲殼類動(dòng)物脫殼期使用蛭弧菌產(chǎn)品，因?yàn)榧讱ゎ悇?dòng)物在脫殼期是非常虛弱的，也極易被一些有害菌感染，控菌工作非常重要，但是一些化學(xué)消毒劑存在刺激性，同時(shí)來的快、去的快，意義不大。而蛭弧菌則完美地解決了這個(gè)問題，其幾乎沒有刺激性，控菌時(shí)間又長，只不過要求養(yǎng)殖者需要提前2天~3天使用即可，如果在使用補(bǔ)鈣制劑后再使用蛭弧菌，可能繁殖效果會(huì)更好，控菌效果也會(huì)更明顯。
第四、配合化學(xué)消毒劑治療暴發(fā)性疾病。5月~8月份，往往有一些季節(jié)性暴發(fā)的疾病，存在著難治療、易反復(fù)等特點(diǎn)，而在使用化學(xué)消毒劑的時(shí)候，往往存在來得快、去得快的問題，這應(yīng)該是易反復(fù)的主要原因，這個(gè)時(shí)候，就可以將化學(xué)消毒劑與蛭弧菌配合使用了，因?yàn)轵位【谶@方面有自己的特性：其見效慢，但見效長。見效慢是因?yàn)閯偡敝车臅r(shí)候，蛭弧菌需要時(shí)間，一般是24小時(shí)~48小時(shí)才見效；見效長，則是在很多研究中都指明，蛭弧菌控制有害菌的時(shí)間可以長達(dá)15天左右。
因此，當(dāng)使用化學(xué)消毒劑見效后，在12小時(shí)以后即可使用蛭弧菌類產(chǎn)品，每天一次，連續(xù)2次左右，這樣水體的短期、長期控菌就可以做到更好。
第五、定期預(yù)防的使用。
定期預(yù)防幾個(gè)關(guān)鍵問題，比如能不能和其他微生物一起使用？多少天使用一次？在上面蛭弧菌的特性中，我們談到其偏向革蘭氏陰性菌，相對裂解較少的革蘭氏陽性菌。
實(shí)際上徐琴等人（2009）的研究指出，加噬菌蛭弧菌和黏紅酵母組的試驗(yàn)效果不理想,表明這兩株菌體之間有一定的拮抗作用。而聯(lián)合使用噬菌蛭弧菌和球形紅假單胞菌（是紫色非硫光合細(xì)菌紅假單胞菌屬的一個(gè)種）組展示了凈化水質(zhì)、預(yù)防病害的優(yōu)良前景，此組能有效地吸收氨氮、硫化物等有害物質(zhì)。這也指出了蛭弧菌是直接可以和某些光合細(xì)菌直接混合使用的，這一點(diǎn)大大提高了使用的方便性。
另外，淡水漁業(yè)研究中心漁業(yè)環(huán)境保護(hù)研究室陳家長等人（2003年）曾在螃蟹養(yǎng)殖中，間隔使用光合細(xì)菌和蛭弧菌：每20天用噬菌蛭弧菌和光合細(xì)菌各1次，使用方法為使用光合細(xì)菌1周后使用噬菌蛭弧菌，實(shí)驗(yàn)周期3個(gè)月。其中，蛭弧菌濃度為107cfu/mL，光合細(xì)菌為109cfu/mL。這樣間隔使用的效果也非常不錯(cuò)，25天后養(yǎng)殖中華絨螯蟹實(shí)驗(yàn)組比對照組池塘中的細(xì)菌總數(shù)少2個(gè)數(shù)量級(jí)，70天后實(shí)驗(yàn)組比對照組池塘中的細(xì)菌總數(shù)少3個(gè)數(shù)量級(jí)，另外試驗(yàn)池塘的COD、氨氮及硫化物有明顯的降低，有效地提高了中華絨螯蟹的成活率（本文沒有探討如何混合使用）。
總體來說，如果出于預(yù)防考慮，和其他微生物可以間隔使用，這樣最安全。當(dāng)然如果真要混合使用，可以考慮和一些光合細(xì)菌配合，基本上不要考慮酵母或乳酸菌的混合使用了。
另外，間隔使用的話，可以考慮上邊陳家長等人的方案，即7天用一次其他有益菌，之后再使用蛭弧菌，14天之后再用其他有益菌，形成一個(gè)使用循環(huán)，效果更佳。
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