2022-04-28 15:01:14
最近，一波腦洞清奇的操作引發(fā)圍觀——在新冠抗原檢測板的小孔里滴入橙汁或者可樂，檢測結(jié)果竟然也能顯示“兩條線”……有謠言說吃橙子、喝可樂會影響檢測結(jié)果，也有網(wǎng)友直呼，假陽性是不是來得有些太容易了。然而，從研發(fā)人員的角度看，這些所謂的“假陽性”完全是無中生有。
“歸根結(jié)底，任何檢測產(chǎn)品要想得到確切的結(jié)果都應(yīng)該按照說明書來使用，這是一個基本常識。”華大因源中通量研發(fā)總監(jiān)徐磊告訴科技日報記者，部分抗原檢測產(chǎn)品雖然走出了實驗室，但是進行檢測、驗證的環(huán)節(jié)歸根結(jié)底是一個實驗，用戶應(yīng)該遵循基本的試驗守則。
4月25日，在北京市朝陽區(qū)八里莊街道一處核酸采樣點，市民在排隊等候進行核酸采樣。圖片來源：新華社
橙汁、可樂為啥能顯陽
上海市臨床檢驗中心臨床免疫室教授朱宇清對上述操作進行了驗證性試驗，她發(fā)現(xiàn)有的檢測試劑盒能夠甄別出“壞試驗”，顯示試驗無效；有的試劑盒會被“蒙蔽”，質(zhì)控線正常，并顯示弱陽性。
究其原因，獲批上市的抗原試劑盒中使用了不同的基底成分。
那么，為什么橙汁和可樂會讓有的抗原檢測顯出假陽性呢？
真正的陽性顯色，是由于抗原檢測捕捉到了病毒的蛋白質(zhì)，在檢測線處發(fā)生了抗體與病毒蛋白結(jié)合的反應(yīng)，并且激發(fā)了顯色反應(yīng)，質(zhì)控線和檢測線都顯色。
橙汁、可樂也能讓檢測線顯色，是因為兩種酸性溶液直接激發(fā)了顯色反應(yīng)，使得無需病毒蛋白的存在，就能顯色。在化學(xué)反應(yīng)中，溶液體系內(nèi)的PH值至關(guān)重要，決定了離子的解離和結(jié)合。
想象一下，日常生活中把白醋加入熱牛奶會導(dǎo)致絮狀沉淀，就不難理解PH值導(dǎo)致的蛋白變性（結(jié)合在檢測板上的抗體也是一種蛋白），由于酸堿度變化改變了化學(xué)結(jié)構(gòu)，繼而導(dǎo)致了其顯色反應(yīng)的進一步發(fā)生，造成假陽性。朱宇清在其科普文章中解釋：直接將橙子汁滴入試劑板條，溶液PH值過低，以及橙汁里面有維生素C，大量還原劑容易導(dǎo)致氯金酸膠體金異常聚集，部分膠體金析出，報告假陽性。
在試劑盒的設(shè)計中，專門有一個設(shè)計避免PH值的變化，那就是緩沖溶液。這種溶液對汗液、空氣等帶來的少量PH值波動起到“緩沖”的作用，避免整個反應(yīng)體系因微小變化引發(fā)劇烈變化，繼而對結(jié)果產(chǎn)生影響。即便如此，緩沖溶液也“緩沖”不了人為大量酸性物質(zhì)加入帶來的對整個實驗結(jié)果的破壞性影響。
拒絕假陽性，抗原檢測見招拆招
為了檢測方便，抗原和抗體的反應(yīng)和顯色反應(yīng)被凝集到一塊薄薄的檢測板上完成。但由于膠體金免疫層析技術(shù)采用物理吸附的方法，抗原/抗體容易從金顆粒表面脫離，標(biāo)記物不穩(wěn)定，才使得橙汁、可樂就能讓反應(yīng)環(huán)境發(fā)生變化，帶來假陽性。
圖片來源：視覺中國
截至4月27日，國家藥監(jiān)局已批準(zhǔn)30個新冠病毒抗原檢測試劑產(chǎn)品。所有的獲批產(chǎn)品的檢測原理可分為三種乳膠法、膠體金法、熒光免疫層析法。
三種方法的原理都是雙抗夾心法，但顯色的信號物不同。
膠體金法的信號物是納米金顆粒，是可見光顏色信號，通常肉眼可觀察結(jié)果；乳膠法是涂了色源，同樣也是可見光，通過肉眼觀察結(jié)果；熒光免疫層析法的信號物是熒光物質(zhì)，需要給予適合的激發(fā)光才能發(fā)射出相應(yīng)的熒光，所以通常需要特定儀器觀察檢測結(jié)果，但熒光物質(zhì)相比膠體金穩(wěn)定性更高，適用于半定量檢測，所以熒光免疫層析的靈敏度相較前兩者更高。
“顯色信號物更加穩(wěn)定，將避免一些違背規(guī)范操作帶來的假陽性的發(fā)生。” 徐磊說，為了增加顯色信號物的穩(wěn)定性，華大的抗原檢測產(chǎn)品采用納米微球為載體技術(shù)，結(jié)合熒光標(biāo)記物探針，在載體和發(fā)光方面都大大提高了顯色的穩(wěn)定性。此外，檢測信號不依靠肉眼觀察，而是通過熒光識別設(shè)備進行定量，因此提供的信息更具診斷價值，且較傳統(tǒng)的膠體金層析檢測技術(shù)靈敏度高約10倍。
可見，并非抗原檢測容易“假陽性”，明明是操作出格，別讓橙子、可樂再背鍋了。
來源：科技日報微信公號
編輯：牛姣
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